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中國(guó)團(tuán)隊(duì)獲首張非洲豬瘟病毒圖 助力開發(fā)新型非洲豬瘟疫苗

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2019-10-19  來(lái)源:澎湃新聞  瀏覽次數(shù):63
核心提示:中國(guó)團(tuán)隊(duì)獲首張非洲豬瘟病毒結(jié)構(gòu)高清圖
非洲豬瘟病毒(ASFV),一種巨大、復(fù)雜而古老的DNA病毒。大約100年前,它在非洲肯尼亞被首次確定,而在2018年8月3日,中國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部新聞辦公室通報(bào)我國(guó)首例非洲豬瘟疫情,隨后病毒很快傳播到全國(guó)大部分地區(qū)。

北京時(shí)間10月18日凌晨,團(tuán)隊(duì)的第一項(xiàng)成果發(fā)表在國(guó)際頂級(jí)學(xué)術(shù)期刊《科學(xué)》(Science):《非洲豬瘟病毒結(jié)構(gòu)及裝配機(jī)制》(Architecture of African Swine Fever Virus and implications for viral assembly)。饒子和、王祥喜、歩志高為共同通訊作者。

“非洲豬瘟是一個(gè)世界難題,有近百年的流行歷史,1921年在肯尼亞首次確定,二十世紀(jì)中葉進(jìn)入歐洲,1978年進(jìn)入西班牙,西班牙用了33年時(shí)間消滅了它,這是一場(chǎng)持久戰(zhàn)。”在10月18日上午舉行的新聞發(fā)布會(huì)上,王祥喜如此表示。

盡管目前非洲豬瘟防控仍然沒有有效疫苗,但步志高認(rèn)為,“中國(guó)在未來(lái)肯定會(huì)防控住,絕對(duì)不會(huì)是三十多年,我相信未來(lái)幾年我們會(huì)取得很大的成效。”與此同時(shí),他將眼下的工作視作“萬(wàn)里長(zhǎng)征第一步”,“ 目前我們的疫苗取得了進(jìn)展,但離比較完美的疫苗、離一個(gè)更好的疫苗還有很大的差距。”步志高表示,此番解析的病毒結(jié)構(gòu)“已經(jīng)給我們提供了很好的線索”。

非洲豬瘟病毒是一類古老的病毒,早在1921年在非洲肯尼亞首次發(fā)現(xiàn),至今有約100年的歷史。

非洲豬瘟即是由非洲豬瘟病毒引起的家豬、野豬的一種急性、熱性、高度接觸性動(dòng)物傳染病,所有品種和年齡的豬均可感染,發(fā)病率和死亡率高可達(dá)100%。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將其列為法定報(bào)告動(dòng)物疫病,中國(guó)也將其列為一類動(dòng)物疫病。

近百年來(lái),非洲豬瘟病毒從非洲傳播至歐洲、南美洲、亞洲等多個(gè)國(guó)家。近一年來(lái),非洲豬瘟病毒傳播速度明顯加快,呈現(xiàn)愈演愈烈趨勢(shì),據(jù)國(guó)際動(dòng)物健康組織通報(bào)數(shù)據(jù)顯示,2019年1月至2019年10月期間,曾暴發(fā)或者正在暴發(fā)非洲豬瘟疫情的國(guó)家有26個(gè),包含13個(gè)歐洲國(guó)家、10個(gè)亞洲國(guó)家和3個(gè)非洲國(guó)家,其中亞洲幾個(gè)國(guó)家的疫情尤為嚴(yán)重。

2018年8月3日,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部新聞辦公室通報(bào)我國(guó)首例非洲豬瘟疫情,隨后病毒很快傳播到全國(guó)大部分地區(qū)。而中國(guó)是全世界最大的豬肉生產(chǎn)和消費(fèi)國(guó),生豬產(chǎn)業(yè)在國(guó)民經(jīng)濟(jì)發(fā)展和人民群眾生活中具有不可替代的重要作用。

值得注意的是,由于沒有疫苗和其他治療手段,撲殺豬是眼下控制疫情最有效的方法。論文中提到,2018-2019年期間,3000多萬(wàn)頭豬已經(jīng)被撲殺。據(jù)估計(jì),非洲豬瘟流行病給全世界的養(yǎng)豬業(yè)已造成了20億美元的經(jīng)濟(jì)損失。

王祥喜在發(fā)布會(huì)上對(duì)包括澎湃新聞在內(nèi)的媒體介紹,科學(xué)家目前對(duì)這非洲豬瘟病毒的認(rèn)知非常有限,“科學(xué)家不知道病毒的生命周期,也不知道病毒感染以后引起機(jī)體免疫應(yīng)答的機(jī)制是什么,更不了解它的共進(jìn)化規(guī)律,甚至不知道病毒長(zhǎng)什么樣、包含哪些蛋白、這些蛋白分別什么作用。”

正是由于科學(xué)家面對(duì)的這個(gè)“對(duì)手”至今神秘,防控一直充滿挑戰(zhàn)。例如,西班牙在1978年首次被這個(gè)“對(duì)手”擊中,隨后的33年里,都被它的陰影籠罩。

中國(guó)的非洲豬瘟疫情為何如此嚴(yán)重?相比西班牙,防控條件又如何?步志高在發(fā)布會(huì)上表示,“第一、中國(guó)生豬養(yǎng)殖量和密度是世界之最,全球50%的生豬養(yǎng)殖量在中國(guó),密度大防控難度就更大。第二,我們有一個(gè)基本的國(guó)情,中國(guó)仍然是一個(gè)發(fā)展中國(guó)家,尤其在農(nóng)業(yè)、農(nóng)村板塊,疾病防控的條件比起西班牙等許多國(guó)家更加不利、挑戰(zhàn)更加艱巨。”

但步志高同時(shí)提到,“我也相信,在國(guó)家高度的重視下,在農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的有力領(lǐng)導(dǎo)組織下,在未來(lái)肯定會(huì)防控住,絕對(duì)不會(huì)是33年,我相信未來(lái)幾年我們會(huì)取得很大的成效。”

100T海量數(shù)據(jù)背后:最大病毒之一

這一殺傷力極大的病毒,在饒子和等人的這項(xiàng)最新成果里,呈現(xiàn)效果卻被大多數(shù)專家用“漂亮”來(lái)形容。

研究團(tuán)隊(duì)采用單顆粒三維重構(gòu)的方法首次解析了非洲豬瘟病毒全顆粒的三維結(jié)構(gòu),闡明了非洲豬瘟病毒獨(dú)有的5層(外膜、衣殼、雙層內(nèi)膜、核心殼層和基因組)結(jié)構(gòu)特征,病毒顆粒包含3萬(wàn)余個(gè)蛋白亞基,組裝成直徑約為260納米的球形顆粒,是目前解析近原子分辨率結(jié)構(gòu)的最大病毒顆粒。

王祥喜介紹,相比之下,2015年其團(tuán)隊(duì)解析的甲肝病毒(HAV)直徑為30納米, 隨后解析的寨卡病毒(ZIKA)為50納米,乙型腦炎病毒(JEV)為50納米,去年解析的單純皰疹病毒(HSV)直徑為125納米,“我們認(rèn)為單純皰疹病毒包含了3000-4000個(gè)蛋白,但今年解析的非洲豬瘟病毒有260納米,這種五層結(jié)構(gòu)在病毒領(lǐng)域是非常少見的。”

就五層結(jié)構(gòu)中的衣殼,研究團(tuán)隊(duì)獲得了由17280個(gè)蛋白質(zhì)組成的結(jié)構(gòu)(4.1埃),王祥喜介紹道,“有12個(gè)紫色的頂點(diǎn),20個(gè)黃色的三角面,30個(gè)藍(lán)色的‘拉鏈’結(jié)構(gòu)。”而衣殼的內(nèi)表面則可以看到有很多分子間的復(fù)雜的相互作用網(wǎng)絡(luò),正是這些相互作用網(wǎng)絡(luò),決定了該病毒結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。

非洲豬瘟病毒主要衣殼蛋白p72的三位結(jié)構(gòu),及p72三聚體在病毒表面的排列方式

至于病毒的表面,絕大部分由主要衣殼蛋白p72的三維結(jié)構(gòu)組成。“因此,p72的三聚體是主要的保護(hù)性抗原之一,也是新型疫苗設(shè)計(jì)的主要靶標(biāo)。我們?cè)谶@結(jié)構(gòu)下發(fā)現(xiàn)了4個(gè)潛在的非常重要的抗原表位,這4個(gè)表位可以為未來(lái)新型疫苗的設(shè)計(jì)提供很好的線索。”

值得一提的是,上述成果的得出,還有賴于步志高團(tuán)隊(duì)去年分離得到第一株非洲豬瘟病毒,以及上海科技大學(xué)生物電鏡中心的“綠燈放行”。

王祥喜介紹,“我們和步志高團(tuán)隊(duì)進(jìn)行合作,對(duì)病毒進(jìn)行純化和冷凍電鏡制樣、數(shù)據(jù)收集。在數(shù)據(jù)收集的過(guò)程中,這個(gè)尺度非常大的病毒就帶來(lái)一些挑戰(zhàn),首先需要不停優(yōu)化純化方法,另外冷凍電鏡的每張片子都只能呈現(xiàn)1-2個(gè)病毒顆粒。”

據(jù)上海科技大學(xué)副教務(wù)長(zhǎng)江舸介紹,上科大生物電鏡中心去年年底剛剛完成安裝調(diào)試,該中心特別保障了4個(gè)月的電鏡機(jī)時(shí),完全投入到非洲豬瘟病毒的攻關(guān),最終獲得超過(guò)100T的海量數(shù)據(jù)。“即使在今年的春節(jié)期間,電鏡中心的工作人員仍然和整個(gè)科研團(tuán)隊(duì)在馬不停蹄地工作中。”

王祥喜在發(fā)布會(huì)現(xiàn)場(chǎng)總結(jié)道,此番解析的非洲豬瘟病毒顆粒結(jié)構(gòu)是“直徑超過(guò)200納米的大病毒顆粒中解析分辨率是最高”。顆粒越大,即意味著解析的難度越大,“目前直徑大于200納米的,分辨率沒有好于10埃,我們這次結(jié)構(gòu)解析不管在技術(shù)層面上還是病毒層面上都是一個(gè)很好的突破。”

助力開發(fā)新型非洲豬瘟疫苗,這些基礎(chǔ)研究最終指向的是非洲豬瘟疫苗的開發(fā)。

目前,歐洲、美國(guó)等國(guó)家相繼有科研團(tuán)隊(duì)和公司宣布開發(fā)相關(guān)疫苗,但尚無(wú)成功投入使用。中國(guó)作為非洲豬瘟疫苗研究的“新手”,步志高認(rèn)為大家“任重而道遠(yuǎn)”。

談及疫苗問題,步志高表示,非洲豬瘟疫苗的挑戰(zhàn)性可能在動(dòng)物的所有疫病當(dāng)中是最大的。“現(xiàn)階段來(lái)講,我們是在缺乏一個(gè)非常清晰的理論指導(dǎo)下來(lái)開展這個(gè)疫苗開發(fā),仍然像過(guò)去幾十年的老辦法一樣,就是在動(dòng)物身上嘗試,至于能保護(hù)的免疫機(jī)制是什么,我們還不是太清楚。”步志高認(rèn)為,這方面有很多科學(xué)的問題要去探索,這樣才能夠給疫苗研發(fā)提供頂層的設(shè)計(jì)理論指導(dǎo)。

“今天我們工作是萬(wàn)里長(zhǎng)征第一步,但也是非常好非常重要的一個(gè)開始。”步志高坦言,我們?cè)谝呙绶矫嫒〉昧诉M(jìn)展,但離比較完美的疫苗、離一個(gè)更好的疫苗還是有很大的差距,“有這個(gè)理論的指導(dǎo),可以幫助我們未來(lái)設(shè)計(jì)更安全、更有效的疫苗,從全球范圍來(lái)講,理論的意義是非常大的。”

值得一提的是,據(jù)中國(guó)農(nóng)科院9月宣布,哈爾濱獸醫(yī)研究所在前期基因缺失疫苗自主研發(fā)工作的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步篩選出一株非洲豬瘟雙基因缺失弱毒活疫苗,已完成了實(shí)驗(yàn)室研究,突破了以原代骨髓巨噬細(xì)胞實(shí)現(xiàn)疫苗規(guī)模化生產(chǎn)的重大技術(shù)瓶頸,完成了獸藥GMP條件下的中間產(chǎn)品制備和檢驗(yàn)。近期已提出生物安全評(píng)價(jià)申請(qǐng)。

步志高在發(fā)布會(huì)現(xiàn)場(chǎng)詳細(xì)介紹,疫苗的研發(fā)有其規(guī)律,第一階段是實(shí)驗(yàn)室研究,第二階段是產(chǎn)業(yè)化的工藝研究,第三階段是臨床試驗(yàn),只有三個(gè)階段都完成以后,疫苗才基本研發(fā)成功,隨后推向應(yīng)用。

哈爾濱獸醫(yī)研究所在第一階段嘗試了十幾種疫苗的技術(shù)方案和路線,最后遴選出在實(shí)驗(yàn)室階段安全有效的候選株;同時(shí),部分疫苗的第二階段工作已經(jīng)基本完成;下一步有望進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。

“這個(gè)階段要走下去需要專業(yè)機(jī)構(gòu)按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部關(guān)于動(dòng)物疫苗評(píng)價(jià)的規(guī)范,重點(diǎn)對(duì)它的安全性、有效性作同行評(píng)估,專業(yè)機(jī)構(gòu)在仔細(xì)研究我們提交的材料以后認(rèn)可了這兩個(gè)方面,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部就會(huì)批準(zhǔn)我們的臨床試驗(yàn),新型非洲豬瘟疫苗才可以進(jìn)入下一階段。”步志高表示,“目前就處于這樣一個(gè)階段,專業(yè)機(jī)構(gòu)應(yīng)該在對(duì)這些數(shù)據(jù)進(jìn)行認(rèn)真嚴(yán)格的審查過(guò)程中。”

值得注意的是,未來(lái)或有更多的團(tuán)隊(duì)加入到進(jìn)一步的研究中。 
 
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